Один ответственный нюанс судьбы PC – собственная торговля секреторными пузырьками на поверхность клеток и собственная интернализация в endosomes, каковые получают переработки к так называемой сети транс-Гольджи, центр торговли, где секреторные пузырьки и endosomes обменивают груз белка, и где PC, как думали, выполнили солидную часть их активирующей белок работы.Лаборатория Даниэла Конштама в ISREC (EPFL) сейчас развивала предназначенные биодатчики, каковые смогут изображение определенные PC на подклеточном уровне, так преодолевая неприятности наложения. Биодатчики основаны на уникальной молекуле датчика, развитой Конштамом в 2010 называющиеся ВИДЕОКЛИП (Связанный с клеткой Индикатор Proteolysis) к изображению, где convertase ферменты клетки активны в живых клетках.С биодатчиками ВИДЕОКЛИПА исследователи смогли удачно отследить деятельность «формирующего прототип» PC, furin, в подклеточной резолюции.
Торговля Фурина, как показывали, оказывала влияние на собственную деятельность, регулируя, к каким белкам она может получить доступ и активировать; иначе говоря furin деятельность зависит от того, где она обогащена в клетке.Применяя ингибитор PC, исследователи нашли что, в то время, когда в endosomes, furin вдесятеро менее запрещен, но обогатил больше чем три раза если сравнивать с сетью транс-Гольджи. Второй PC, что сопротивляется этому ингибитору (PC7), был активен в хороших пузырьках, и это лишь достигло сети транс-Гольджи, endosomes и поверхности клеток, в то время, когда это было сверхвыражено.«Мы особенно интересуемся одним из оснований, Активина-A, из-за его сравнительно не так давно найденной иммунодепрессивной роли в меланоме», говорит Даниэл Конштам. «Мы сейчас нашли, что разные ‘помещения’ раскалывают его пошаговым методом, оставляя отметку того, где это было, по-видимому дабы отрегулировать, куда это должно пойти после этого и с кем взаимодействовать».
Исследователи тогда обратили внимание к последовательности аминокислот PC, каковые они изучали. Они нашли, что «мотив PLC» (последовательность трех аминокислот, Пролина, Цистеина и Лейцина) в цитозольном хвосте PC7 определенно требовался для его переработки в сети транс-Гольджи и для спасения раскола проактивина-A в furin-исчерпанных клетках меланомы, но был довольно необязателен для деятельности PC7 в endosomes.
«Отечественное изучение снабжает подтверждение в принципе, что определенные для отделения биодатчики смогут употребляться, чтобы получить сведения о регулировании торговли PC и нанести на карту тропизм определенных для PC ингибиторов», говорит первый создатель изучения, Пьерпаоло Джинефра. «Это похоже на игру Cluedo: мы желаем знать, в каком из помещения (помещений) в клетке данное основание расколото и что PC».